從營養(yǎng)和安全的角度來看，脂質(zhì)體具有巨大的營養(yǎng)載體潛力。盡管脂質(zhì)體具有生物相容性、生物降解性、無毒性和非免疫原性等優(yōu)點，但其較差的理化穩(wěn)定性嚴重限制了其在食品工業(yè)和制藥領(lǐng)域的應(yīng)用。穩(wěn)定性差的原因：1、磷脂對酯基水解和不飽和酰基鏈氧化引起的磷脂化學(xué)降解的高度敏感性，這有助于脂質(zhì)體膜的結(jié)構(gòu)破壞；2、囊泡融合導(dǎo)致囊泡變大和沉淀，由于脂質(zhì)降解和/或溫度波動，疏水性生物活性化合物與脂質(zhì)雙層可能發(fā)生相分離，這也會導(dǎo)致嵌入的生物活性化合物泄漏；3、由于脂質(zhì)降解和/或溫度波動，疏水性生物活性化合物與脂質(zhì)雙層可能發(fā)生相分離，這也會導(dǎo)致嵌入的生物活性化合物泄漏。因此，如何降低脂質(zhì)體對環(huán)境的敏感性并實現(xiàn)脂質(zhì)體的有效利用仍然值得關(guān)注。

與修改脂質(zhì)體膜組成的繁瑣方案相比，在脂質(zhì)體表面進行涂層被認為是有效提高其穩(wěn)定性經(jīng)濟且有效的方法。在眾多涂層材料中，殼聚糖是形成保護性聚電解質(zhì)層的zui/佳選擇，因為其正電荷容易與帶負電荷的脂質(zhì)體表面相互作用。

選取低（LCS）、高（HCS）分子量殼聚糖以三種梯度濃度（L：低；M：中等；H：高）包衣的脂質(zhì)體（Cur-LP）進行穩(wěn)定性評估。

1. 材料和方法   

1.1脂質(zhì)體的制備  

采用薄膜水合法結(jié)合高壓均質(zhì)法制備Cur-LP，減小了囊泡尺寸，提高了脂質(zhì)體的均一性。

通過蠕動泵將制備的Cur-LP分散液滴加到低分子量殼聚糖（LCS）和高分子量殼聚糖（HCS）溶液中，體積比為3:5，磁力攪拌60分鐘。滴速為2.5 mL/min。基于每種殼聚糖的預(yù)設(shè)梯度濃度（分別為1、2.5和5mg/mL），在與Cur-LP分散液混合后，殼聚糖的最終濃度被稀釋至0.625、1.563和3.125mg/mL。這三種濃度被稱為低（L）、中（M）和高（H）濃度的殼聚糖。因此，LCS-L（-M，-H）和HCS-L（-M，-H）定義了由低（中、高）濃度的低分子量和高分子量殼聚糖包覆的Cur-LP。將樣品儲存在4°C冰箱中用于進一步分析。

1.2 物理穩(wěn)定性分析  

使用 LUMiSizer®進行測試，轉(zhuǎn)速：2000 rpm、測試譜線數(shù)量：360，時間間隔：10 s、溫度：25 ℃。以不穩(wěn)定性指數(shù)隨時間變化曲線以表示樣品在測試過程中的失穩(wěn)狀態(tài)，不穩(wěn)定性指數(shù)越高代表體系越不穩(wěn)定，反之乳狀液穩(wěn)定。

2. 結(jié)果與分析  

圖1 根據(jù)LUMiSizer測量結(jié)果，在25℃下，添加殼聚糖涂層和不添加殼聚糖涂層的Cur-LP的透光率圖譜(A1-A7)和不穩(wěn)定性指數(shù)曲線(B)

使用LUMiSizer進行了囊泡的離心穩(wěn)定性試驗（圖1）。如圖1所示，LUMiSizer透光率曲線的顏色從紅色逐漸變?yōu)榫G色，代表掃描時間的動態(tài)變化。樣品界面處（110mm附近）透光率隨測試的進行逐漸升高，這表明囊泡不斷向樣品管底部遷移。Cur-LP樣品整體透光率增加，表明囊泡在離心作用下快速向樣品管底部遷移，形成沉淀。相反，在有殼聚糖包被的Cur-LP樣品透光率變化明顯降低。樣品管上部和下部之間不同的透光率變化表明囊泡遷移減緩。無論是LCS還是HCS，當殼聚糖濃度增加時，這一現(xiàn)象更為顯著。換言之，殼聚糖涂層和增加濃度都有效地改善了Cur-LP的物理穩(wěn)定性。Tan還發(fā)現(xiàn)，在有殼聚糖涂層的情況下，使用相同的檢測方法，負載有類胡蘿卜素的脂質(zhì)體穩(wěn)定性有所提高。為了量化穩(wěn)定性差異，確定了不穩(wěn)定性指數(shù)曲線（圖1B）。當殼聚糖濃度較低時，LCS-L囊泡的穩(wěn)定性HCS-L。正如較小的曲線斜率所示，較小尺寸的囊泡比較大的囊泡移動得慢。當殼聚糖濃度增加到中等水平時，相似的斜率表明LCS-M和HCS-M脂質(zhì)體之間的離心穩(wěn)定性相似。這主要歸因于高分子量的殼聚糖制備的脂質(zhì)體囊泡之間排斥阻力更強，粘度更高。作為一種兩親性聚電解質(zhì)，殼聚糖同時具有靜電和粘滯穩(wěn)定機制，在離心作用下減緩了囊泡的移動。此外，殼聚糖的粘度隨著其濃度和分子量的增加而增加，所以HCS-H沉淀速度最慢。考慮到HCS涂層的Cur-LP具有相對較大的囊泡尺寸，我們得出結(jié)論，具有殼聚糖涂層的脂質(zhì)體的囊泡大小和物理穩(wěn)定性之間存在明顯的聯(lián)系。增加殼聚糖的分子量和濃度可以協(xié)同穩(wěn)定姜黃素脂質(zhì)體。離心穩(wěn)定性結(jié)果與儲存穩(wěn)定性分析的囊泡大小變化結(jié)果一致。

3. 結(jié)論

增加殼聚糖的分子量和濃度可以有效提高Cur-LP的穩(wěn)定性，其中HCS-H涂層表現(xiàn)出最佳的性能。殼聚糖涂層在體外穩(wěn)定性方面也表現(xiàn)出積極作用，有望用于制造具有更長保質(zhì)期的脂質(zhì)體食品，并顯著提高生物活性化合物的生物利用度，如姜黃素的情況所示。

在較高濃度下，高分子量殼聚糖的應(yīng)用，是一種很有前景的提高Cur-LP體外穩(wěn)定性和緩釋的包覆材料。

LUMiSizer分散體系分析儀，應(yīng)用STEP技術(shù)，對配方穩(wěn)定性分析提供了快捷有效的工具。不僅可以同時檢測12個樣品，而且多波長（近紅外865nm、藍光410nm）覆蓋多品類樣品的測試，為用戶可提供更多更深入的分析信息，極大提高了工作效率。